国家药品监督管理局

国家药品标准

WS₁-XG-       -2002

脑苷肌肽注射液
Naoganjitai Zhusheye
Cattle Encephalon Glycoside and Ignotin Injection

本品系由健康家兔肌肉提取物和牛脑提取物混合制成的无菌水溶液。多肽含量应为标示量的85.0%～115.0%，唾液酸应为标示量的85.0%～115.0%。

【性状】 本品为无色或微黄色澄明液体。

【检查】 (1) 取本品1ml，加茚三酮试液数滴，加热，应显紫色。

(2) 取神经节苷脂GM1，加磷酸盐缓冲液(pH 7.4)制成每1ml含0.2mg的溶液。照薄层色谱法(中国药典2000年版二部附录V B)试验，分别吸取本品及上述溶液各50m l，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇-0.2%氯化钙溶液(60:45:10)为展开剂，展开后，晾干，喷以间苯二酚溶液，喷后即加玻片封盖(两玻璃片间需用夹夹紧)，120℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱图的主斑点的颜色及位置应与神经节苷脂GM1色谱图的斑点一致。

【含量测定】 pH值 应为6.5～8.0(中国药典2000年版二部附录Ⅵ H)。

蛋白质 取本品1ml，加20%磺基水杨酸溶液1ml，不得产生浑浊。

高分子量物质 照高效液相色谱法(中国药典2000年版二部附录V D)测定。

色谱条件与系统适用性试验 用凝胶色谱柱(如 TSK GEL 2000SWxl 7.8mm×300mm，5μm)；流动相为三氟醋酸-乙腈-水(0.05:10:90)；检测波长为214nm。理论板数按胰岛素峰计算应不低于3000。

参比溶液的制备 取胰岛素(分子量5800)适量，用流动相制成每1ml中含1mg的溶液。

测定法 取参比溶液和供试品各20m l，分别注入液相色谱仪，记录色谱图，小于胰岛素峰保留时间的峰面积，按面积归一化法计算，不得过5.0%。

异常毒性 取本品，依法检查(中国药典2000年版二部附录Ⅺ C)，按静脉注射法给药，应符合规定。

过敏试验 取体重250～350g健康豚鼠6只，间日腹腔注射本品0.5ml，连续3次，在第三次注射后的第十四天，自静脉注射本品1.0ml，注射后15分钟内观察动物，均不得出现连续干

咳、连续前爪抓鼻、明显耸毛、四肢发软、躺卧、呼吸困难、痉挛、虚脱及死亡现象。连续观察3天，动物应健存。

细菌内霉素 取本品，依法检查(中国药典2000年版二部附录Ⅺ E)，每1ml中含细菌内毒素的量应小于5EU。

其他 应符合注射剂项下有关的各项规定(中国药典2000年版二部附录I B)。

【含量测定】 多肽 取本品，加水制成每1ml中约含多肽0.15mg的溶液，作为供试品溶液，照福林酚测定法(附件)测定。

唾液酸 参比溶液的制备 取唾液酸参比试剂适量，加0.9%氯化钠溶液制成每1ml中含100m g的溶液。

标准曲线的制备 精密量取参比溶液0.0、0.5、1.0、1.5、2.0ml，分别置具塞试管中，各加水至2.0ml，再分别精密加入间苯二酚溶液（取2％间苯二酚溶液10ml、2.5％硫酸铜溶液0.25ml，盐酸80ml，加水至100ml）2ml，摇匀，置水浴中反应15分钟，取出置冷水中10分钟。分别精密加醋酸正丁酯-正丁醇(85:15)5ml，剧烈振摇后放置15分钟。取上层液于585nm的波长处测定吸收度；以0管作为空白。以测得的吸收度与对应的浓度计算回归方程。

测定法 取本品，加0.9％氯化钠溶液制成每1ml中约含唾液酸50m g的溶液，作为供试品溶液。精密量取供试品溶液2ml，照标准曲线的制备项下的方法，自“精密加入间苯二酚溶液”起，依法测定，从回归方程求得供试品溶液的浓度，并乘以稀释倍数，即为唾液酸含量。

【类别】 用于心肌和脑部疾病引起的功能障碍。

【规格】 （1）2ml:1.2mg（多肽）:200m g（唾液酸） （2）5ml:3.0mg（多肽）:500m g（唾液酸） （3）10ml:6.0mg（多肽）:1000m g（唾液酸）

【贮藏】 置冷暗处保存。

【有效期】 暂定1年

附件

试剂 碱性铜溶液 取氢氧化钠10g，碳酸钠50g，加水400ml使溶解，作为甲液；取酒石酸钾0.5g，加水50ml使溶解，另取硫酸铜0.25g，加水30ml使溶解，将两液混合，作为乙液。

临用前，甲液与乙液合并，并加水至500ml。

操作法 (1) 对照品溶液的制备 取牛血清白蛋白对照品，加水制成每1ml中含0.3mg的溶液。

(2) 供试品溶液的制备 照各药品项下的方法制备。

(3) 标准曲线的制备 精密量取对照品溶液0.0、0.1、0.3、0.5、0.7、0.9ml，分别置具塞试管中，各加水至1.0ml，再分别加入碱性铜溶液1.0ml，摇匀，各加入福林酚溶液(福林试液中的贮备液1→16)4.0ml，立即混匀，置55℃水浴中准确反应5分钟，置冷水中10分钟，在650nm的波长处测定吸收度；同时以0管作为空白。以测得的吸收度与对应的浓度计算回归方程。

(4) 测定法 精密量取供试品溶液1.0ml，照标准曲线的制备项下的方法，自“加入碱性铜溶液”起，依法测定，从回归方程求得供试品溶液的浓度，并乘以稀释倍数，即为多肽含量。