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附录E

（标准的附录）

溶血试验

　

E 1 原理

红细胞因药物或毒性物质作用可发生溶解，并释放出血红蛋白，本试验是通过注射器的供试液与血液稀释液直接接触，测定红细胞溶解后释放的血红蛋白量，来检验注射器的体外溶血程度。

E 2 主要试验仪器

分光光度计、离心机、水浴恒温箱

E 3 试剂

  1. 蒸馏水；
    2.
  2. 0.9%氯化钠注射液。

E 4 试验方法

E 4.1 全血稀释液的制备

  1. 2%的全血稀释液的制备

    2. 取新鲜人血或兔血2ml，加0.9%氯化钠注射液稀释至100ml，轻轻混匀（无溶血、凝块）即得。

  2. 1%的全血稀释液的制备

取部分2%的全血稀释液，加入等容积的0.9%氯化钠注射液即得。

E 4.2 操作步骤

E 4.2.1取至少3支自毁型注射器，各加入1%的全血稀释液至全刻度容量，为供试液A。

E 4.2.2取3支试管，各加入1%的全血稀释液10ml，为阴性对照液B。

E 4.2.3取3支试管各加入蒸馏水5ml，2%的全血稀释液5ml，为阳性对照液C。

E 4.2.4把上述A、B、C三种试验液，同时存放于37±1℃的恒温箱中，保持60+5min，再把供试液A分别装入3支试管中，每管各10ml，然后分别离心（1500r/min）5min后，取上清液，用分光光度计于545nm波长处测定吸光度，取其3管的平均值，按以下公式计算溶血率：

                              A-B
                溶血率（%）=-------×100
                        C-B

 式中：A-供试液吸光度；

      B-阴性对照液吸光度；

      C-阳性对照液吸光度。